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使用DAD检测器对安赛蜜中间标准溶液(5.2.1)进行全波段扫描,得到安赛蜜在DAD检测器上的液相优化最大吸收峰图。安赛蜜在DAD检测器上最大吸收峰波长为227nm至230nm。色谱水中
本文对比的流动相为:5%甲醇+95%乙酸铵、4%甲醇+2%乙腈+94%乙酸铵与10%甲醇+90%乙酸铵。定污在液相色谱法检测组分时,安赛流动相的参数配比对检测会起到很重要的影响作用,相同的高效流动相的不同配比也会在很大程度上影响出峰的峰形,甚至不出峰。液相优化
当流动相为5%甲醇+95%乙酸铵时:5%甲醇+95%乙酸铵的色谱水中流动相的配比是目前大部分液相色谱法检测安赛蜜时所使用的流动相的配比,在2.028分钟时有出峰,法测峰形也很明显,定污在高浓度时适合安赛蜜的安赛含量的检测。然而污水中安赛蜜含量较低,参数在较低浓度,高效如0.1mg/L时,安赛蜜在该条件下未出峰。同时,在低浓度时,安赛蜜的校正曲线线性较差。
在低浓度时(0.2mg/L至1.0mg/L),该流动相的配比只能使安赛蜜的相关性系数为0.9600与0.9660,不能满足检测要求,故不适合作为液相色谱法检测安赛蜜在污水中含量的参数条件。
当流动相为4%甲醇+2%乙腈+94%乙酸铵时:乙腈是使用液相色谱法检测时很常见的流动相,因此我们在流动相中加入了少量乙腈,以提高检测器在低浓度时的响应值。当流动相为4%甲醇+2%乙腈+94%乙酸铵时,出峰时间比5%甲醇+95%乙酸铵的流动相的配比时晚一些,峰形同样明显。
从0.1mg/L至10.0mg/L,因为高浓度点为对相关性系数影响较大,因此选用了其中0.1mg/L至1.0mg/L部分。在较低浓度时,该配比的相关系数为0.9999,符合检测要求。然而使用该流动相的配比主要有2个问题,其一是色谱峰距离倒峰较近,会在低浓度时影响峰形,导致峰面积不稳定。其二是随着乙腈的加入,在安赛蜜出峰时间会有干扰物质液相安赛蜜的测定。
在倒峰回正后,有一小段时间的基线波动,而因为安赛蜜出峰时间较贴近倒峰,同时低浓度的峰形不是很明显,使得倒峰后的基线波动对于安赛蜜低浓度的检测有影响。
样品为纯水,其中无安赛蜜组分,但在2.031分钟有干扰物质与安赛蜜同时出峰。污水中,安赛蜜含量普遍较低,该干扰峰会对安赛蜜的测定产生较大的影响。因此该流动相配比也不适用于污水中安赛蜜含量的测定。
当流动相为10%甲醇+90%乙酸铵时:在该流动相配比的条件下,安赛蜜的出峰时间延后,相较于4%甲醇+2%乙腈+94%乙酸铵的配比,其峰形受倒峰回正时引起的基线波动影响较小。当样品浓度为100μg/L时,能够得到较为明显的峰形图,且相关性系数=0.9999,优于另外2个流动相配比的结果。因此选用10%甲醇+90%乙酸铵为液相色谱法检测污水中安赛蜜含量的流动相配比。
本文对比的流动相流速为0.7mL/min与1.0mL/min。
如图1,当流速为0.7mL/min时,在该流速下出峰时间与峰形较为稳定。
如图2,当流速为1.0mL/min时,在该流速下安赛蜜不出峰。流速为0.7mL/min适用于液相色谱法检测污水中安赛蜜含量。
通过本文的不同参数对比可知,得到适用于污水中安赛蜜检测的参数:流速为0.7mL/min,流动相为10%甲醇与90%乙酸铵,紫外吸收波长为227nm。
目前对于污水中安赛蜜检测并没有明确的方法及要求,但随着代糖及相关食品的摄入逐年增多,安赛蜜在污水中的含量会逐年增加,并且浓度会逐渐提高。今后可能会引入安赛蜜这一指标作为我国污水水质特征因子并进行研究,特别是应用在城市排水管网中水质组成和来水溯源调查等工作,这能从一个新的切入点来辨析水质的组成成分及比例。目前样品的前处理方法仅为过滤,而污水样品中的安赛蜜浓度较低,如果将其作为污水水质特征因子进行研究,则需要进一步提高前处理能力,采用如固相萃取、浓缩等方法,优化检测水平,使峰形更明显。
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